百螢問(wèn)答之鈣離子熒光探針腔腸素的工作原理是怎樣的
鈣測(cè)量對(duì)于許多生物學(xué)研究至關(guān)重要,鈣離子熒光探針腔腸素是進(jìn)行鈣測(cè)量的有效工具,跟著小螢一起看看它是怎么工作的吧。
1.百螢 鈣離子熒光探針腔腸素工作原理
水母發(fā)光蛋白復(fù)合物包含22kd的載水母發(fā)光蛋白,分子氧和發(fā)光體腔腸素。當(dāng)三個(gè)ca2 +離子與該配合物結(jié)合時(shí),腔腸素被氧化為腔腸酰胺,并伴有二氧化碳和藍(lán)光的釋放。水母發(fā)光蛋白的生物發(fā)光對(duì)ca2 +濃度的大約三次方依賴性,可以在?0.1 μm至> 100 μm的寬檢測(cè)范圍內(nèi)測(cè)量ca2 +濃度。與熒光ca2 +指示劑不同,可以檢測(cè)ca2 +結(jié)合的水母發(fā)光蛋白而照亮樣品,從而自發(fā)熒光的干擾。腔腸素及其衍生物賦予水母發(fā)光蛋白復(fù)合物不同的ca2 +親和力和光譜性質(zhì)。據(jù)報(bào)道,用腔腸素hcp重組的重組載脂蛋白水泡蛋白總體上具有發(fā)光,同時(shí)具有高產(chǎn)率和快速響應(yīng)時(shí)間。但是,腔腸素類似物在細(xì)胞內(nèi)重建水母發(fā)光蛋白可能相對(duì)較慢。含有腔腸素的cp,f或h形式的水母發(fā)光蛋白顯示的發(fā)光強(qiáng)度是用腔腸素重構(gòu)的脫輔基水母發(fā)光蛋白的發(fā)光強(qiáng)度的10-20倍。腔腸素h和cp已用于gpcr的hts篩選測(cè)定中。
鈣離子熒光探針腔腸素化學(xué)結(jié)構(gòu)
2.百螢 鈣離子熒光探針腔腸素參數(shù)
ex(nm)
429
em(nm)
466
分子量
423.46
溶劑
存儲(chǔ)條件
保存在-15℃以下,避光防潮
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