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視頻作者:北京*通恒科技有限公司
液相色譜理論發(fā)展簡況
色譜法的分離原理是:溶于流動相 (mobile phase)中的各組分經(jīng)過固定相時(shí),由于與固定相(stationary phase) 發(fā)生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同,在固定相中滯留時(shí)間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。 色譜法很早是由植物學(xué)家茨維特(tswett)在1906年研究用碳酸鈣分離植物色素時(shí)發(fā)現(xiàn)的,tswett用希臘語chroma(色)和graphos(譜)描述他的實(shí)驗(yàn),色譜法(chromatography)因之得名。后來在此基礎(chǔ)上發(fā)展出紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法。液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經(jīng)典液相色譜法,此方法柱效低、時(shí)間長(常有幾個(gè)小時(shí))。
液相色譜柱的再生
因?yàn)椋V柱是消耗品,隨著使用時(shí)間或進(jìn)樣次數(shù)的增加,山東*液相色譜,會出現(xiàn)色譜峰高降低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰的現(xiàn)象,一般來說是柱效的下降。
1.反向柱的再生:
2.正相柱的再生:
3.離子交換柱的再生:
長時(shí)間在緩沖溶液中使用和進(jìn)樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降。用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。
特別說明:
再生過程必須隨時(shí)關(guān)注柱壓變化,柱壓過高易導(dǎo)致硅膠變形與開裂及鍵合相*性端連接順序紊亂,*液相色譜方法,同時(shí)要保證再生時(shí)間足夠。再生時(shí)盡量選擇不具備在線脫氣的*泵送系統(tǒng)色譜儀器進(jìn)行
液相色譜
液相色譜(hplc)法是以高壓下的液體為流動相,*液相色譜哪家便宜,并采用顆粒*細(xì)的*固定相的柱色譜分離技術(shù)。 液相色譜對樣品的適用性廣,不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機(jī)化合物中,可用氣相色譜分析的約占20%,而80%則需用*液相色譜來分析。液相色譜和氣相色譜在基本理論方面沒有顯著不同,它們之間的重大差別在于作為流動相的液體與氣體之間的性質(zhì)的差別。
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